Como isolar fungos De mista Flora

Fungos deve ser isolado a partir da influência contaminadora da flora mista selvagens do habitat de fungos. Uma vez separada de outras formas de vida que crescer demais , enfraquecer ou matar os fungos , ele está pronto para ser cultivado linhagens puras em um evironment laboratório controlado. Alguns dos concorrentes flora crescer mais rápido do que os fungos e devorar sua oferta de alimentos. Os flora mista , chamados microbiota indígena por cientistas, incluem protistas , bactérias, outras espécies não desejáveis ​​de fungos e yeast.Things você precisa
Limpe quarto
caixa Inoculação
purificador de ar
Latex luvas
máscara cirúrgica
álcool isopropílico
Agar misturar
Water Fotografia de recipiente Autoclavable
placas de Petri
Scalpel
panela de pressão
população de fungos selvagem
saco de plástico solução de iodo

lâmpada álcool
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Configurar e equipar uma sala limpa para crescer os fungos você deseja isolar e purificar a partir da mistura Contaminantes flora de seu ambiente ao ar livre. Escolha um quarto pintado de fresco com pouca circulação de ar. Use roupas limpas e chuveiro antes de trabalhar com culturas de fungos . Instale um purificador de ar . Evitar a contaminação através do uso de luvas de látex e uma máscara. Spray de suas luvas com freqüência com álcool isopropílico. Manter o nível de organismos flora mista de baixa na sala.
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Prepare a mídia de agar para crescer os fungos durante o processo de isolamento e purificação . Siga as instruções na embalagem para dissolver agar seco em água em um recipiente autoclavável . Empilhar caixas de Petri , bisturis e ágar no interior de uma panela de pressão . Sterilze cozinhando por 25 minutos a 15 psi. Esfrie a panela e coloque os pratos e ferramentas em uma caixa de inoculação com uma tampa de vidro e os buracos na frente para as suas mãos . Despeje o agar para os pratos enquanto está quente . Encha-os no meio do caminho .
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Localize uma população de fungos que você deseja isolar . Selecione um corpo de frutificação limpa, conhecido como um carpophore . Calçar luvas estéreis , recolher o carpophore e colocá-lo em um saco plástico limpo. Leve-o para o laboratório e colocá-lo sobre uma superfície estéril. Desinfecção da pele carpophore com uma solução de iodo e álcool . Cortar pequenas seções do interior depois de descascar a pele. Coloque as peças no centro das caixas de Petri .
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a chama bisturi com uma lâmpada de álcool laboratório após vários cortes para esterilizá-lo . Ajustar a temperatura e grau de humidade para o tipo específico de fungos a ser isoladas . Observe os fungos à medida que cresce para fora no meio do pedaço . Corte e rejeite todas as áreas colonizadas por fungos concorrentes. Despejar a cultura se levedura , poças de bactérias ou mofo preto e verde assumir. Identificar e remover as culturas de fungos de quaisquer flora mista indesejados.
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Continuar para isolar os fungos que você quer crescer da flora contaminante. Cortar triângulos de agar cobertas de fungos cultura pura nas placas de Petri . Escolha secções longe de quaisquer contaminantes de crescimento . Esfaquear os triângulos com o bisturi e transferir cada parte para um novo prato de agar . Faça isso até que apenas puras culturas de fungos isolados são observados crescendo.

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