electroforese em gel de agarose separa as moléculas de ADN com base no tamanho dos fragmentos contidos na amostra . Pequenos furos na parte superior do gel , chamados " poços ", são carregados com o líquido contendo o DNA a ser analisado . Esta extremidade do gel é colocado no ânodo , ou carregado negativamente fonte elétrica .
Pequenos fragmentos
os fragmentos de DNA são desenhados para o cátodo , ou positivamente carregada fonte elétrica . Como as moléculas de migrar através do gel de agarose , que começam a separar de acordo com o tamanho . Os fragmentos mais pequenos de ADN são aqueles de peso molecular mais baixo ; Estes fragmentos são a forma mais rápida para migrar para o fim cátodo do gel.
fragmentos maiores
Como fragmentos de DNA ficam maiores e têm pesos moleculares mais elevados, eles são mais lentos para se mover através do gel de agarose para o cátodo ; por conseguinte , os maiores fragmentos de ADN encontram-se perto da extremidade do ânodo do gel , ao passo que os mais pequenos fragmentos de ADN encontram-se perto da extremidade do cátodo .
Visualization
ADN fragmentos podem ser visualizados sob uma fonte de luz ultravioleta corando -as com um produto químico especial chamado o brometo de etídio . Quando expostos a U.V. DNA luz, fragmentado irá aparecer em uma formação de escada , com os fragmentos mais pesados e maiores de DNA no topo da escada e mais leves , fragmentos de DNA menores na parte inferior da escada.