A reação em cadeia da polimerase , ou PCR , é uma técnica usada para fazer cópias de DNA. Especificamente , a PCR utiliza uma enzima conhecida como uma polimerase , que adiciona as bases de DNA individual a uma cadeia crescente de ADN . A reacção de PCR é dependente dos iniciadores , cadeias curtas de DNA polimerase necessários para iniciar a reprodução do ADN , e a matriz do iniciador , uma mistura de reagentes e os próprios iniciadores . Cada reação de PCR deve ser um volume total de não mais de 50 uL.Things Você vai precisar de
10x PCR buffer
2 mM dNTP
primers 50 pmol
25 mM MgCl2
1 Molde pmol DNA
água purificada
tubos Eppendorf
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Adicionar 2,5 uL de tampão de PCR a um tubo de Eppendorf , bem como 2,5 ul de dNTPs .
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Adicionar 2 uL ( 50 pmol ) dos primers para o tubo de Eppendorf e 1 uL de MgCl2 .
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Adicionar água para chegar a um volume final de 50 uL. Adicionar 1 pmol do ADN molde , ou 1 uL de solução de ADN , o que é mais fácil de medir . É preparado Sua matriz de primer.
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Repita os passos 1 a 3 para o maior número de matrizes como você deseja preparar.
