Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ( ELISA), é usado para determinar a quantidade de anticorpo ou a quantidade de proteína ligada ao anticorpo numa amostra de sangue . O ensaio utiliza a interacção antigénio /anticorpo , em que os complexos de antigénios e formam anticorpos . O antigénio ou o anticorpo na amostra são rotulados com uma enzima . Depois de os complexos de antigénios e anticorpos de forma que eles são capazes de serem detectadas em uma placa de ELISA . A enzima reage com os complexos com um substrato para formar um produto corado que pode ser contado com um contador de placa , a fim de determinar a quantidade de anticorpos presentes na amostra .
Western Blot
a técnica de Western Blot é usado para determinar tanto o peso molecular dos anticorpos e as quantidades relativas de anticorpos presentes numa amostra . Western blot utilizar técnicas de electroforese em gel para separar os anticorpos . Os anticorpos são transferidos para uma folha de nitrocelulose e incubadas com as proteínas genéricos . Uma solução contendo enzimas é adicionado para se ligar a anticorpos específicos . O substrato é adicionado e os anticorpos foram incubados a converter os complexos anticorpo /enzima em um produto colorido , que pode ser visualizado e fotografado para determinar a quantidade de anticorpos presentes .
Fluorescência Citometria de Fluxo
citometria de fluxo de fluorescência é uma técnica que é capaz de contar anticorpos através da medição das propriedades celulares e de anticorpos fluorescentes . Um laser passa através das células e as medições são determinados por meio de alterações na dispersão de luz , absorção de luz e a emissão de luz , à medida que passa através dos detectores na amostra . As mudanças de luz resultantes são transferidos para um programa de software de computador e manipuladas em sinais digitais que são exibidos em um gráfico , a fim de obter a contagem de células específicas para diferentes tipos de células , tais como anticorpos .
Hemocit�etro
a contagem celular em anticorpos pode ser realizada utilizando um hemocitômetro . Uma solução amostra de sangue é preparado num tubo de Eppendorf com uma pipeta . Solução de azul de tripano é adicionado à solução para marcar as células mortas e a mistura adicionada ao hemocitómetro . O hemocit�etro contém linhas de grade em que as contagens de células são feitas usando uma contagem mão enquanto visualiza as linhas de grade sob 10X poder de um microscópio composto .