O acoplamento de bis- tris é importante em bioquímica , devido à sua capacidade de agir como um zwitterion , possuindo um íon positivo e negativo sobre a molécula. Ela pode servir como um tampão na região de pH 7,6 . É adicionado aos geles utilizados na electroforese para ajudar a manter as moléculas em solução e auxilia na separação das moléculas . Tampões de transferência de remover moléculas a partir de placas de gel de análise de electroforese e transferi-las para membranas de transferência de western . Cada fabricante de equipamentos de eletroforese relatórios ligeiramente diferentes receitas para fazer um tampão de transferência, mas o que se segue é para o buffer de transferência usado com sistemas NuPAGE em samples.Things não reduzidos Você vai precisar de
bicina
Bis- tris
EDTA
250 ml copo
Metanol
1000 ml garrafa de água ultrapura
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1
Prepare os ingredientes para o buffer através da pesagem as quantidades de cada componente em uma balança analítica . Os três componentes secos para um tampão de transferência é bicina , bis - tris e EDTA . Peso a 4,08 bicina gm , 5,23 g de bis- tris e 0,29 g de EDTA em papéis com peso individuais.
2
Adicionar esses componentes para um copo de 250 ml . Dissolve-se estes componentes , com 100 ml de metanol . Mexa até dissolver os sólidos
3
Transfira os componentes dissolvidos para uma garrafa de 100 ml e lavar copo com água ultrapura para garantir a transferência de todos os componentes .
4 .
Encher o resto do volume de 1 litro com água ultrapura . Adicionar a água em porções que permitam suficiente mistura entre cada adição . Misture bem o conteúdo para atingir uma concentração uniforme.
