Como apagar meio de cultura celular com nitrogênio

Estudos biológicos utilizar culturas de células para investigar os efeitos das drogas , terapias e práticas sobre os ciclos e atividade das células de vida . O crescimento das células e a manutenção de linhas celulares ocorrem em meios de cultura que é benéfico para as células em questão . A mídia fornece todos os nutrientes e as condições ambientais exigidas pelas células. A maioria das células precisam de uma fonte de nitrogênio para se manter saudável e para suprir algumas das exigências para os muitos processos as células sofrem durante o seu ciclo de vida. Enquanto o nitrogênio é obtido a partir de amônia e outras substâncias que contêm nitrogênio , purgando a mídia também fornece uma fonte para os nitrogen.Things necessárias que você vai precisar
meio de cultura celular
proveta Grande
agitador mecânico
Nitrogênio
tanque tubo Sparging
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Despeje o meio de cultura celular em um grande recipiente e coloque o copo sobre um agitador mecânico . A mistura de agitação do meio durante a purga do fluxo de azoto . Usando este método permite uma preparação de uma grande quantidade de meio para manter a composição mais uniforme .
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Apor um tubo de aspersão com a saída de um tanque de azoto . Um tubo de aspersão é composto por um tubo de vidro com uma ponta de vidro sinterizado incorporado no final do tubo . A extremidade aberta do tubo ligado a uma extensão de tubagem de plástico ligada a um tanque de azoto fornece um fluxo de azoto, à medida que sai da extremidade de vidro sinterizado do tubo por muitas correntes de pequenas bolhas de gás .
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Coloque a extremidade de vidro sinterizado do tubo pulverizador no fundo do copo e ligar o misturador . Definir a taxa de agitação do agitador mecânico para fornecer uma mistura uniforme do meio.
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Ligue o fluxo de nitrogênio no tanque e deixe-a bolha no meio. O nitrogênio vai saturar o meio com nitrogênio como ele se dissolve . Cada líquido possui uma solubilidade finita de gases diferentes . Como o átomo de azoto dissolve-se no meio , outros gases dissolvidos são expelidos a partir do meio . Purga remove gases tais como oxigénio e dióxido de carbono a partir do meio de cultura .
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Permitir a corrente de azoto a borbulhar , pelo menos, 15 minutos para saturar a forma , dependendo da taxa de fluxo do gás . Uma vez que a purga do meio de terminar, retire o tubo de vidro sinterizado da proveta e transferir o meio de cultura celular purgado para um recipiente fechado e guarde-o na geladeira. A temperatura reduzida do frigorífico irá reduzir o grau em que os gases se dissolvem no meio durante o armazenamento.